Тест на ДНК-фрагментацию сперматозоидов

Мужское бесплодие зачастую имеет многофакторную природу и включает широкий спектр различных нарушений, которые затрагивают сразу несколько систем организма. Наиболее важными считаются генетические факторы, определяющие развитие сперматозоидов. Плохое качество спермы влияет не только на сам процесс оплодотворения, но и на развитие зародыша, а также может приводить к развитию различных аномалий. При этом риски увеличиваются при повреждении (фрагментации) ДНК половых клеток.

Методы изучения генетического материала половых клеток

Для того чтобы установить причину бесплодия или определить возможные риски, супруги проходят комплексное обследование, в которое может быть включен тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов. Он может проводиться разными способами. Наиболее распространенные из них:

• SCD;
• TUNEL;
• HALO;
• COMET.

TUNEL. На сегодняшний день самый популярный анализ для оценки фрагментации ДНК. Он относится к прямым способам, то есть определяет истинные разрывы, а не потенциально возможные. В его основе лежит метод FISH. В процессе выполнения анализа особый фермент — терминальная трансфераза — соединяется с флюоресцентной меткой, с помощью этого комплекса прокрашиваются участки разрыва ДНК в зеленый цвет. Здоровые сперматозоиды окрашиваются в красный. Далее проводится подсчет процента клеток с поврежденными хромосомами.

SCD и его модификация HALO. Сперматозоиды обрабатываются ферментами, и их хромосомы подвергаются гидролизу. После этого их прокрашивают и исследуют под микроскопом. Здоровые спермии имеют ареол (HALO-эффект) вокруг головки, а поврежденные либо не образуют его вовсе, либо он минимален.

COMET. В основе метода лежит распределение ДНК с помощью электрофореза на высоко- и низкомолекулярные фракции. Низкомолекулярная фракция напоминает хвост кометы, отсюда и название. Чем больше этот хвост, тем более выражена фрагментация.

У каждого метода есть свои особенности, однако в каждом случае можно выделить несколько одинаковых этапов. Сначала мужчина сдает образец эякулята, затем сперматозоиды отделяются от семенной жидкости, обрабатываются специальным раствором, который денатурирует ДНК, после чего клетки изучаются под микроскопом. При этом может быть использовано специальное программное обеспечение для подсчета результатов теста на фрагментацию ДНК сперматозоидов.

Причины патологии

Изменение структуры ДНК может развиваться по разным причинам. Их все можно разделить на две большие группы — внешние и внутренние. Группа внешних причин наиболее объемная. Она включает:

• специфические методы лечения (лучевая терапия, химиотерапия);
• сопутствующие заболевания репродуктивной системы, в частности варикоз яичка;
• работа во вредных условиях труда (высокая температура, химические вещества);
• вредные привычки и др.

К внутренним причинам относятся различные врожденные изменения в процессах, которые контролируют процесс созревания сперматозоидов. Как правило, такие изменения происходят на генетическом уровне, поэтому повлиять на них невозможно.

Определить точную причину повреждения половых клеток тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов не может. Однако исследование позволяет выявить саму проблему и подобрать оптимальный метод ее устранения. В последующем анализ может быть проведен повторно с целью оценки эффективности выбранной тактики лечения.

Tunel тест: показания для исследования

Тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов обычно включается в программу комплексного обследования пары в следующих случаях:

• невозможность забеременеть в течение года;
• многократное прерывание беременности на разных сроках;
• неудачные попытки ИКСИ и ЭКО;
• поздний отцовский возраст (более 45 лет);
• перед криоконсервацией спермы;
• при наличии у мужчины варикоцеле;
• при выявлении изменений в спермограмме.

Тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов можно сдать и без наличия показаний. Обычно исследование востребовано среди супружеских пар, которые проходят обследование перед беременностью и желают получить максимально полную информацию о состоянии своего здоровья, исключив тем самым возможные риски. В этом случае анализ проводится по желанию мужчины.

Экспертное мнение врача

Колмаков А.С.

Врач уролог, андролог, онкоуролог, Врач ультразвуковой диагностики

Основные параметры сперматозоидов не всегда позволяют определить уровень фертильности мужчины и оценить его способность к зачатию. Чтобы получить более точный результат, проводится тест на ДНК-фрагментацию сперматозоидов. Это исследование позволяет определить процент поврежденного генетического материала. При показателе выше 15–18 % способность к зачатию здорового плода снижается. Таким пациентам показана консультация андролога и углубленное обследование, направленное на выявление причин имеющихся дефектов в структуре ДНК сперматозоидов.

Стоимость услуг

Как проводится тест на фрагментацию ДНК?

Перед исследованием необходимо пройти простую подготовку. Прежде всего, мужчина должен воздержаться от половых контактов, посещения бани и сауны, курения и употребления алкоголя за 3–5 дней до проведения теста на фрагментацию ДНК сперматозоидов. За день до исследования следует отказаться от тяжелой физической работы. Если накануне мужчина перенес острые инфекционные заболевания, если ему проводился массаж простаты или специфическое лечение (УВЧ-терапия), то исследование необходимо перенести на другой день.

Непосредственно в день проведения теста на фрагментацию ДНК сперматозоидов необходимо выполнить гигиену наружных половых органов и прийти в клинику к назначенному времени. Образец эякулята собирается путем мастурбации в стерильный контейнер, который затем отправляется на исследование в лабораторию.

Результаты теста на фрагментацию ДНК сперматозоидов выдаются в виде процентов. В норме фрагментированные половые клетки не должны превышать 15 %. Если этот показатель выходит за указанные границы, то мужчина направляется на консультацию к андрологу или репродуктологу.

Увеличенное время разжижения семенной жидкости

Недостаток или отсутствие сперматозоидов

Недостаточная подвижность сперматозоидов

Патологии строения сперматозоидов