Иммуногистохимия — способ исследования биологического материала после окрашивания с помощью специфических антител, которые связываются с определяемым веществом. Этот метод был разработан еще в первой половине ХХ века и к настоящему времени получил колоссальное развитие.
Выделяют два способа проведения реакции:
- Прямая иммуногистохимия — маркированные антитела специфически связываются с определяемым веществом.
- Непрямая иммуногистохимия. Она проводится в два этапа. Сначала немаркированные антитела связываются с определяемым в ткани веществом, а потом этот комплекс детектируется с помощью вторичных меченных антител. Таким образом, первичный комплекс выступает для вторичных антител как антиген. Этот метод является более чувствительным и специфичным. Соответственно, он обладает большей информативностью.
Антитела, используемые в иммуногистохимии, могут быть маркированы следующим способом:
- флуоресцентными красителями. Для их обнаружения необходимы специальные микроскопы;
- ферменты. Например, пероксидаза хрена или щелочная фосфатаза. Детекцию такого результата проводят с помощью обычного оптического микроскопа;
- электронно-плотные частицы — золото, ферритин. Для таких реакций требуются электронные микроскопы.
Применение технологии в репродуктивной медицине
Иммуногистохимия в репродуктивной медицине применяется для диагностики причин бесплодия и оценки потенциальной эффективности ЭКО. Известно, что беременность при применении вспомогательных репродуктивных технологий наступает у 35–45 % пациенток после первой попытки. Около 30 % пациенток имеют многократные неудачи, причины которых различны, в том числе неблагоприятное состояние эндометрия.
Долгое время для изучения патологии эндометрия использовался гистологический метод исследования. Однако он не позволял достоверно оценить рецептивную способность эндометрия, что породило потребность в поиске более информативных методов диагностики. Одним из них стала иммуногистохимия, которую в настоящее время используют в следующих целях:
- Исследование структурных особенностей эндометрия.
- Определение способности эндометрия к имплантации.
- Определение негативных факторов наступления беременности, например, гиперэкспрессии альфа-эстрогеновых рецепторов в железистых и стромальных клетках в среднелютеиновую фазу, снижение прогестерон+ стромальных клеток.
- Определение благоприятных факторов наступления беременности — оптимальное соотношение прогестероновых и эстрогеновых рецепторов, количество эндометриальных эпителиоцитов с пиноподиями более 50 %.
- Оценка восприимчивости эндометрия к гормонам. На основании полученной информации корректируют дозу гормональных препаратов, используемых на этапах планирования и проведения ЭКО.
- Определение иммунокомпетентных клеток-киллеров, препятствующих наступлению беременности.
Сараева О.В.
Акушер -гинеколог, репродуктолог. Гинеколог-эндокринолог. Врач высшей категории. Кандидат медицинских наук.
Иммуногистохимия представляет собой гораздо более информативный метод диагностики, чем классическая гистология. Методика позволяет с точностью определить состояние эндометрия и выявить причины бесплодия или множественных неудач ЭКО. Кроме того, она может использоваться в прогнозировании результатов экстракорпорального оплодотворения. Несмотря на относительную техническую сложность реализации, иммуногистохимические исследования получают все большее распространение в сфере репродуктивной медицины.
Как проводится иммуногистохимия
Для проведения исследования требуется фрагмент эндометрия, который получают во время проведения биопсии (раздельного диагностического выскабливания или пайпель-биопсии). Этот материал помещается в забуференный формалин и направляется в лабораторию, где проходит несколько этапов обработки:
- Фиксация и проводка. Эти процедуры необходимы, чтобы сохранить структуру ткани максимально неповрежденной.
- Изготовление парафиновых блоков. Подготовленный материал заливают парафином. С этого момента блок может храниться неограниченное количество времени, не теряя своих свойств. При необходимости, в любой момент из него могут быть приготовлены гистологические препараты.
- Изготовление гистологических препаратов. Ткань нарезают с помощью микротома на тонкие пластинки, толщиной несколько микрометров (это в десятки раз меньше, чем толщина волоса), фиксируют на стекле и окрашивают красителями для гистологического и иммуногистохимического исследования.
- На финальной стадии препараты оценивает врач-патоморфолог.
В заключении выдаются результаты как гистологического, так и иммуногистохимического исследования. На этом основании лечащий врач выбирает оптимальный метод лечения.
Как забеременеть в 35?
По рекомендациям ВОЗ оптимальным возрастом для беременности является промежуток от 20 до 30 лет, однако по разным причинам женщины могут планировать ее позже.
Лечение бесплодия у женщин
В наше время бесплодие является не только медицинской, но и социальной проблемой.
Повышенный уровень тестостерона у женщин
Тестостерон — один из главных мужских гормонов, однако в определенном количестве он вырабатывается яичниками и надпочечниками у женщин.
